AABB认证咨询-AABB CT 标准 5.6 条款全面解读：构建细胞治疗操作全环节的 “安全合规屏障” - 相关文章 - AABB 认证咨询 - 医学实验室认证｜认可 - 服务项目 - 肯达信实验室建设专家

在细胞治疗临床转化中，操作环节的规范性直接决定产品质量 —— 从细胞制备时的着装防护，到不同批次产品的隔离处理，再到辐照过程的精准控制，任何微小失误都可能引发污染、混淆或疗效损失。AABB CT 标准 5.6 “方法和操作控制” 条款，围绕 “细节管控 - 风险预防 - 持续验证” 三大逻辑，分四小节细化操作要求，覆盖 “常规操作 - 无菌保障 - 防错机制 - 特殊处理” 全场景，为机构提供可落地的操作规范，有效解决 “无菌技术不达标”“批次混淆”“意外辐照” 等行业痛点。

一、细胞治疗产品操作：以 “全细节规范” 筑牢基础防线

5.6.1 条款明确细胞治疗产品操作需覆盖 9 个核心方面，这些要求并非 “形式化规定”，而是从实践中提炼的风险防控关键点，每一项都对应具体的质量安全隐患。

1. 人员防护与环境控制：阻断 “人源性”“环境源性” 污染

着装与 PPE（1）：要求员工按场景穿戴合适装备，例如细胞制备区需穿无菌净化服（覆盖全身，戴无菌手套、口罩、鞋套），采集区需穿一次性隔离衣 —— 这是防止人员毛发、皮屑污染细胞的关键。某干细胞实验室曾因员工未戴无菌手套操作，导致 2 批次细胞培养出现细菌污染，后续严格执行着装规范后，污染率从 12% 降至 1.5%。
生物安全柜 / 受控空间（2）：明确污染风险高的操作（如细胞分选、病毒转导）需在生物安全柜内进行，且需定期验证柜内气流（如每年一次 HEPA 滤网完整性测试）、清洁消毒（每次使用后用 75% 乙醇擦拭台面）。这一要求可将气溶胶传播污染风险降低 90% 以上，是 CAR-T 细胞制备的 “标配防护”。

2. 物料与流程管控：避免 “操作失误” 导致的质量偏差

物料与设备明确（3）：要求每道工序提前确认所需物料（如培养基、离心管）和设备（如离心机、移液器），避免操作中临时寻找导致流程中断或错用物料（如将普通离心管误用于超高速离心，导致管体破裂）。
关键计算步骤（5）：针对细胞剂量计算、试剂稀释等关键环节，需双人核对（如一人计算、一人复核），例如 CAR-T 细胞输注剂量需根据患者体重（kg）× 目标剂量（×10⁶ cells/kg）计算，核对可避免剂量错误（如少算一个数量级导致疗效不足）。
转运与取样（6）（7）：物料转运需用密闭容器（如带防震垫的试剂转运箱），避免泄漏；细胞取样需无菌操作（如用无菌吸管，取样后立即密封），且需标记清楚（如注明样本编号、取样时间），防止样本混淆。

3. 环境参数与废物处置：保障 “过程稳定” 与 “末端安全”

环境控制限值（8）：明确温度（如细胞培养区 20-24℃）、湿度（30%-60%）、气体浓度（如 CO₂培养箱 5%±0.5%）的可接受范围，需实时监控（如每小时记录一次），避免环境波动影响细胞活性（如湿度低于 30% 导致培养基蒸发过快，渗透压升高）。
废物处置（9）：细胞治疗副产物（如用过的培养皿、剩余细胞悬液）需按医疗废物管理规范处理，例如感染性废物需装黄色医疗垃圾袋，高压灭菌后再交由专业机构处置，避免生物安全风险（如剩余 CAR-T 细胞泄漏导致环境暴露）。

二、无菌方法：构建 “多层级” 污染防控体系

5.6.2 条款针对细胞治疗 “无菌性” 核心需求，从 “环境 - 过程 - 人员 - 验证” 四维度建立体系，且要求定期审查有效性（C5.6.2.1），避免无菌控制 “流于形式”。

1. 环境控制与监测：打造 “低污染” 操作环境

要求环境控制方案与污染风险匹配 —— 高风险区域（如细胞制备洁净室）需达到 ISO 8 级（动态），且需定期监测（如每周一次沉降菌检测，每季度一次浮游菌检测），沉降菌限值为≤10 CFU / 皿（Φ90mm，培养 48h）。低风险区域（如物料暂存区）可适当放宽，但需每月监测表面微生物（如用无菌棉签擦拭台面，菌落数≤5 CFU/25cm²）。某细胞治疗中心通过该方案，及时发现洁净室 HEPA 滤网破损导致的浮游菌超标（达 30 CFU/m³），更换滤网后恢复合格，避免了批量污染。

2. 过程控制与人员培训：强化 “操作层面” 无菌意识

过程控制：要求无菌操作全程遵循 “单向流” 原则（如物料从洁净区外侧向内侧传递，人员从一更→二更→洁净区，不逆向），且避免不必要的操作（如在生物安全柜内频繁移动手臂，破坏气流）。
人员培训：需对所有涉及无菌操作的员工进行专项培训（如无菌手套穿戴、无菌接管技术），培训后通过实操考核（如在模拟环境中进行细胞接种，考核无菌操作合格率），且每半年复训一次。某机构数据显示，经过系统培训的员工，无菌操作失误率从 25% 降至 3%。

3. 定期审查：确保无菌方法 “持续有效”

C5.6.2.1 要求定期（如每季度）审查无菌措施的有效性，审查内容包括：环境监测数据趋势（如沉降菌是否呈上升趋势）、无菌操作失误记录、污染事件分析（如近 3 个月是否有因无菌问题导致的产品报废）。若发现问题（如某季度污染率上升至 8%），需追溯原因（如员工培训不到位、生物安全柜未按时维护），并调整措施（如增加复训频次、缩短维护周期），形成 “监测 - 审查 - 改进” 的闭环。

三、操作控制：以 “隔离与标记” 预防混淆与交叉污染

5.6.3 条款的核心是 “防混淆、防交叉污染”，通过物理隔离、时间隔离、标记审查等措施，解决细胞治疗多批次、多类型产品同时操作的管理难题。

1. 隔离措施：从 “空间 + 时间” 双重阻断风险

物理隔离（2）（3）：不同类型细胞产品（如造血干细胞、CAR-T 细胞）需在不同操作间处理；同一类型不同批次产品需在生物安全柜内分区放置（如用无菌隔板分隔），且使用专用设备（如不同批次用不同移液器）。某实验室曾因未物理隔离，导致两批次 CAR-T 细胞样本交叉污染，后续采用 “一柜一批次” 操作后，未再发生类似事件。
时间隔离（3）：若无法实现物理隔离（如只有一个洁净室），需通过时间间隔（如两批次操作间隔≥30 分钟），且间隔期间需对操作台面、设备进行彻底清洁消毒（如用含氯消毒剂擦拭，再用无菌水冲洗），避免前一批次残留细胞污染后一批次。

2. 流程与标记管控：避免 “信息缺失” 导致的失误

物料与设备移动（1）：明确工作区域内物料（如试剂、样本）和设备的移动路线（如从物料入口→暂存区→操作区，不随意穿行），且废物需及时清理（如操作结束后 30 分钟内移除废物），避免占用操作空间导致混乱。
过程标记（6）：所有物料、样本、产品需全程标记（如标签注明产品名称、批次、状态），且标记需清晰不易脱落（如用防水标签，避免消毒时模糊）。
文书标识检查（7）：关键步骤（如细胞输注前）需双人核对文书标识（如产品标签与医嘱单上的患者信息、产品批次是否一致），避免 “错输”—— 这是保障患者安全的最后一道防线，某医院通过该措施，及时发现 1 例 “产品与患者不匹配” 的错误，避免了严重后果。

四、辐照和白细胞减少：特殊处理的 “精准管控”

5.6.4 条款针对细胞治疗中常见的 “辐照”（如血液成分辐照预防 GVHD）和 “白细胞减少”（如去白细胞过滤），提出专项管控要求，核心是 “预防意外、确保精准”。

1. 预防意外事件：避免 “非预期” 的辐照或去白

要求制定预防措施，例如：

辐照预防（5.6.4.1）：辐照设备需设置 “双重确认” 程序（如一人设置参数、一人复核），且需有警示标识（如辐照室门外贴 “正在辐照，禁止入内”）；非辐照产品需单独存放，且标记 “禁止辐照”，避免误放入辐照室。
去白预防：去白细胞过滤器需按患者 / 产品匹配选择（如成人用 170μm 孔径，儿童用 130μm 孔径），使用前核对过滤器型号与产品类型，避免错用导致过滤失效（如用成人过滤器处理儿童小体积血液，导致细胞损失过多）。

2. 关联标识要求：与追溯体系联动

条款参考标准 5.8.2A（产品标识），要求辐照或去白后的产品需在标签上注明 “已辐照”“已去白” 及相关参数（如辐照剂量 25Gy、去白后白细胞残留量＜5×10⁶），便于后续追溯（如患者出现 GVHD，可核查辐照记录）。某移植中心通过该标识管理，快速确认 1 例 GVHD 患者的移植材料已按要求辐照（剂量达标），排除了操作失误因素，为病因排查节省了时间。

总结：5.6 条款 —— 细胞治疗操作的 “标准化行动手册”

AABB CT 标准 5.6 条款的核心价值，在于将细胞治疗操作从 “经验化” 转变为 “标准化”，通过覆盖 “人员 - 环境 - 物料 - 流程 - 特殊处理” 的全维度要求，为机构提供可复制、可验证的操作方案。对于细胞治疗机构而言，落地该条款需把握三个核心：一是将细节要求（如着装、标记）融入 SOP，确保员工 “有章可循”；二是将无菌方法、隔离控制与日常监测结合，形成 “风险前置防控”；三是定期审查与改进，确保操作规范 “持续适配”。只有这样，才能真正发挥操作控制的 “安全屏障” 作用，为细胞治疗产品质量与患者安全保驾护航。